國家藥品監督管理局(NMPA)要求2020年7月份開(kāi)始按照ICH指導原則開(kāi)展研究《生物技術(shù)生物制品質(zhì)量:生物技術(shù)/生物制品穩定性試驗》,其中就包括Q5C,Q5E。
藥品評審中心(CDE)在2020年9月上線(xiàn)了《臨床試驗期間生物制品藥學(xué)研究和變更技術(shù)指導原則》 要求如下:
“確證性臨床試驗階段,應參考 ICH Q5C、《生物制品穩定性研究技術(shù)指導原則(試行)》等相關(guān)指導原則制定全面的穩定性研究方案,以支持擬申請上市產(chǎn)品貯存期的設定[F]。應在藥物研發(fā)階段進(jìn)行原液的影響因素試驗(如特別 pH、光照、振蕩、凍融、高溫、氧化等),并在上市申請前完成,以確認原液內在的穩定性、潛在的降解途徑及擬用的分析方法穩定性指示能力與適用性。"
1.3生產(chǎn)工藝與過(guò)程控制的描述應明確所有連續步驟的工藝流程,包括相關(guān)的工藝參數和過(guò)程控制(IPCs)[E]。如需要對相關(guān)的IPCs進(jìn)行修訂,應重新考慮檢測項目和相應的可接受限度的適用性。應適時(shí)對工藝參數和過(guò)程控制結果進(jìn)行評估,以確保工藝和產(chǎn)品質(zhì)量可控,進(jìn)行趨勢分析和統計分析(如適用),并評估對產(chǎn)品質(zhì)量的影響。應說(shuō)明原液的貯存和運輸條件[E]參照國內外指導原則并結合現有的經(jīng)驗和認知,臨床試驗期間對安全性有潛在影響的藥學(xué)變更事項,包含但不限于:原液:放寬儲存條件,或因為安全性原因變更儲存條件[E]Q5C:生物技術(shù)生物制品質(zhì)量:生物技術(shù)、生物制品穩定性試驗用于穩定性試驗的原液質(zhì)量應能代表用于臨床前研究、臨床研究以及規?;a(chǎn)制品的質(zhì)量。此外,中試規模生產(chǎn)的原液,生產(chǎn)工藝和貯存條件與規?;a(chǎn)相比應具有代表性。由于大多數生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品需明確規定貯藏溫度,因此,進(jìn)行真實(shí)時(shí)間/真實(shí)溫度的穩定性研究,條件應與規定的貯藏溫度相同。Q5E:生物技術(shù)產(chǎn)品/生物制品在生物工藝變更前后的可比性某些生產(chǎn)工藝的變更,即使是微小變更,也可能造成變更后產(chǎn)品穩定性的改變。因為蛋白質(zhì)通常對工藝變更非常敏感,任何可能引起蛋白質(zhì)結構或純度和雜質(zhì)譜改變的變更,都應評估其對穩定性的影響,如緩沖液組成、加工和儲存條件、有機溶劑的使用。
評審中心2020年對生物制品上市評審過(guò)程中關(guān)于凍融方面的意見(jiàn)③ 僅對工藝操作參數進(jìn)行驗證,缺少對過(guò)程控制水平和工藝性能的評估和驗證。④ 缺乏全生命周期管理和持續工藝驗證的意識。提交上市申請時(shí),應采用商業(yè)化規模、代表性工藝和批次( 至少連續 3 批) ,盡可能考察工藝差條件開(kāi)展工藝驗證,以確認擬上市工藝的穩健性。制劑工藝驗證應關(guān)注原液凍融、混合、除菌過(guò)濾、無(wú)菌灌裝、凍干工藝等;
而需要注意的是,原液凍融在實(shí)驗室規模和實(shí)際生產(chǎn)規模方面差異巨大。凍融曲線(xiàn)將會(huì )隨著(zhù)體積大小,形狀,接觸材質(zhì),冷凍方向等因素發(fā)生改變。
在實(shí)驗階段,小體積比如300ml放入超低溫冰箱。一般曲線(xiàn)是這樣的。

大體積,比如3.5L,瓶子的曲線(xiàn)是這樣的: